Mirus品牌FAQ

1、 Mirus广谱DNA转染试剂TransIT®-LT1TransIT®-2020TransIT-X2®三者的区别是什么?

2、TransIT®-LT1转染试剂的主要成分是什么?

3、TransIT®-2020转染试剂的主要成分是什么?

4、TransIT®-2020适用于转染哪些细胞?

5、ransIT-X2® Dynamic Delivery System的主要成分是什么?

6、TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemPEIPolyethyeleneimine)是类似的东西吗?

7、TransIT-X可用于贴壁和悬浮细胞转染吗?

8、TransIT-X可以转染原代细胞吗?

9、TransIT-X可以转染神经细胞吗?

10、抗生素会影响转染试剂的作用吗?

11、如何优化转染效率?

12、转染结果不理想时该怎么办?

 



 

 

1、Mirus广谱DNA转染试剂TransIT®-LT1TransIT®-2020TransIT-X三者的区别是什么?

TransIT®- LT1TransIT®-2020TransIT-X2®都是高效的广谱转染试剂,但它们的化学性质不同,三者特点见下表。TransIT-X2是首选用于高效基因表达及敲除的广谱转染试剂。TransIT-X2能高效地转染质粒DNAsiRNA,也可用于二者共转。TransIT®-LT1TransIT®-2020仅适用于质粒DNA的转染。TransIT®-2020TransIT-X2®都是无动物源成分配方,因此可满足有条件限制的应用需求,例如药物开发等。对于不同的细胞类型,不同转染试剂表现效果也有不同,因此对于不同细胞类型的具体应用,可以参考我们的转染试剂推荐方案数据库Reagent Agent。(https://www.mirusbio.com/tech-resources/transfection-database

特点

TransIT-X2® Dynamic Delivery System

TransIT®-2020 Transfection Reagent

TransIT®-LT1 Transfection Reagent

转染核酸类型

DNA, siRNA, miRNA, pre-miRNA

DNA

DNA

细胞毒性

极低

高效基因敲除

?

不适用*

不适用*

DNAsiRNA共转

?

不适用

不适用

动物源成分

*:目的基因敲除也可以通过转染编码shRNA的质粒DNA来实现,但该方法敲除基因不如siRNA/miRNA高效。

 

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2、TransIT®-LT1转染试剂的主要成分是什么?

TransIT®-LT1是一种非脂质体的广谱转染试剂,主要配方是由脂质及蛋白/聚胺混合物组成。它是市面上第一款脂类/聚合物复合配方转染试剂,同时具备高转染效率和低细胞毒性特征。

 

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3、TransIT®-2020转染试剂的主要成分是什么?

TransIT®-2020是一种专利的脂类-聚合物混合配方转染试剂,可与DNA形成多聚物脂复合物。TransIT®-2020配方中不含任何动物源成分。

 

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4、TransIT®-2020适用于转染哪些细胞?

TransIT®-2020是广谱转染试剂,适用于转染多种类型细胞。

· 细胞系,包括贴壁细胞和悬浮细胞(例如HepG2, MCF-7, Neuro-2aK562Jurkat等)点击右侧链接可以查看适用TransIT®-2020转染的细胞类型View a complete listing of cell lines transfected using TransIT®-2020 (PDF)

· 原代细胞和干细胞View a complete listing of primary and stem cells transfected using TransIT®-2020 (PDF)

 

 

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5、TransIT-X2® Dynamic Delivery System的主要成分是什么?

TransIT-X2® Dynamic Delivery System是一种先进的非脂质体转染系统,由一种全新型聚合物搭配Mirus专利配方,更容易与核酸形成复合物,适用于质粒DNA与小分子核酸如siRNAmiRNApre-miRNA等的高效转染。此外,TransIT-X2®还能实现质粒DNAsiRNA共转染。TransIT-X2®配方中不含任何动物源成分。

 

 

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6、TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemPEIPolyethyeleneimine)是类似的东西吗?

不是的。TransIT-X2®是一种全新的聚合物配方并非基于PEI的改良产品。

 

 

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7、TransIT-X可用于贴壁和悬浮细胞转染吗?

可以。经测试,我们已经TransIT-X2成功转染过多种贴壁细胞(如CHO-K1HepG2,原代人乳腺上皮细胞等)和悬浮细胞(如Freestyle 293-F

 

 

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8、TransIT-X可以转染原代细胞吗?

可以。TransIT-X适用于转染多种原代细胞,我们已经测试过HUVECs,原代人乳腺上皮细胞(HMEC)以及正常人皮肤成纤维细胞(NHDF)等原代细胞转染效率都不错。

 

 

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9、TransIT-X可以转染神经细胞吗?

可以。我们测试过iCell® Neurons, SH-SY5Y, SK-N-MC and PC-12等神经细胞转染效率都很不错。点击右侧链接可以查看适用TransIT-X转染的细胞类型以及推荐用量。View a complete listing of cell types transfected using TransIT-X2® by Mirus scientists and corresponding starting reagent-to-nucleic acid ratios. (PDF)

 

 

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10、抗生素会影响转染试剂的作用吗?

某些抗生素如卡那霉素是阳离子,会抑制转染试剂/核酸形成复合物,因此我们建议在转染试剂复合物形成这一环节不要使用抗生素。转染试剂复合物形成后,我们就可以加入到含有低水平抗生素的完全细胞培养基里了(例如将100×-链霉素双抗稀释到0.1-1×工作浓度的细胞培养基)。

 

 

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11、如何优化转染效率?

1)      转染时的细胞密度 (%) 大多数细胞在转染时细胞密度最好能达到40%-80%,但是不同类型细胞有其最佳的转染密度,在优化转染效率时要先确认细胞的最佳转染密度

2)      转染试剂与DNA比例转染试剂与DNA的使用比例通常是1-4ul1ugDNA,不同细胞可根据实际转染效率进行不同配比的优化

3)      DNA质粒的质量转染用的DNA必须是无菌,高浓度,且去除内毒素的质粒。Mirus有一款内毒素去除试剂盒(MiraCLEAN® Endotoxin Removal Kit,货号MIR5900/MIR5910)可以质粒中残存的内毒素;

4)      转染试剂与核酸形成复合物要在无血清的培养基中进行血清可能会干扰转染试剂与核酸形成复合物,因此在配置转染试剂与核酸复合物时需要无血清、无抗生素的培养基,将复合物加入细胞的时候,细胞培养基是可以含血清的。

 

 

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12、转染结果不理想时该怎么办?

Mirus每款转染试剂的说明书最后都有TROUBLESHOOTING GUIDE,可以帮助客户对照结果查找问题原因,大部分转染不理想的问题都可以通过优化操作步骤来解决,因此每一个使用Mirus转染试剂的客户,都应在转染前认真阅读产品说明书。

 

 

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